Основниот принцип на синтезата на ДНК

Хемиската синтеза на ДНК се заснова на стратегијата за синтеза во цврста фаза и хемијата на фосфорамидит.Различно од биолошката синтеза на ДНК, материјалот во хемиската синтеза на ДНК е ДМТ (4, 4-диметокситритил) и деоксирибоксизид модифициран со фосфорамидит, како што е прикажано на слика 1. Синтезата на ДНК се изведува на цврстата поддршка (можеме да понудиме различниКолона за синтеза на олиго), односно CPG (контролирана пора стакло) и PS (полистирен), а целата синтеза се изведува наДНК/РНК синтисајзер, која е нашата главна опрема, има различен модел како што се: HY Едноканален синтисајзер, HY-12, HY-192 и слично, насоката на синтезата е од 3' до 5', а нуклеотид се внесува во цврстата поддршка преку еден циклус на синтеза.Типично синтетскиот циклус содржи четири чекори, дезаштита, спојување, покривање и оксидација (Слика 2).Дезаштитата е поставена да ја отстранува DMT групата на цврстата поддршка или 5' хидроксилната група на претходниот нуклеозид, 3% трихлороцетна киселина во дихлорометан се користи како реагенс за дезаштита.Потоа на модифицираниот фосфорамидит деоксирибоксизид му беше дозволено да изложи хидроксилна група со помош на активатор, т.е. 5-етилтиотетразол или 4, 5-дицијаноимидазол, формирајќи го фосфитетриестерот (III) и го реализираше чекорот на Спојување.Се изведува чекор за покривање за да се блокира нереагираната хидроксилна група за време на чекорот на спојување, за да се минимизира формирањето на несакани секвенци на дефекти.Конечно, нестабилниот фосфитетриестер (III) се оксидира до хемиски стабилен фосфортриестер (V) со јод како оксиданс во сегашноста на пиридин.

Синтетизираната ДНК може да се отцепи од цврстата поддршка со аминолиза, 2-цијаноетил заштитената група на фосфортристерот и амидот на нуклеобазата се расцепува во исто време, синтезните плочи и синтетичките столбови во решетките се ставаат директно во комората за реакција одОпрема за дезаштита.Суровата ДНК може да се подготви со HPLC, електрофореза и OPC на барање, ние исто така можеме да ви ги обезбедимеОпрема за прочистувањеза пост-обработка.